埃希氏大肠菌及查验办法_黑龙江福彩P62开奖结果
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埃希氏大肠菌及查验

一、界说:

  大肠埃希氏菌习气称为大肠杆菌,分类于肠杆菌科,归属于埃希氏菌属,而且大肠杆菌株ATCC 11775是该属的形式菌种。大肠杆菌的差别菌株间DNA相干性为80%,而与同科的志贺氏菌属(除鲍氏志贺氏菌外)的DNA相干性可达80-87%。与人类疾病有关的大肠杆菌,统称为致泻性大肠杆菌(此称号不易与致病性大肠杆菌相混杂),普通包罗五种:即肠毒生性大肠杆菌(ETEC)、致病性大肠杆菌(EPEC)、出血性大肠杆菌(EHEC)、侵袭性大肠杆菌(EIEC)和粘附性大肠杆菌(EAEC)。

二、生物学特性:

根本形状特性:

  此菌为两头钝圆的短小杆菌,普通巨细约0.5μ-0.8μm*1.0μm-3.0μm,因生长条件差别,一般菌体可呈类似球状或长丝状。此菌多独自存在或成双,但不呈长链状陈列。约有50%左右的菌株具有周生鞭毛而能活动,但少数菌体只要1-4根,普通不超越10根,故菌体动力衰;少数菌株生长有比鞭毛细、短、直且数目多的菌毛,有的菌株具有荚膜或微荚膜;不构成芽胞,对平凡碱性染料着色精良,革兰氏染色阴性。

培育特性:

  由于此菌分解代谢才能强,在含无机盐、胺盐、葡萄糖的平凡培育基上生长精良。最适生长温度为37℃,在42-44℃条件下仍能生长,生长温度范畴为15-46℃。在平凡养分琼脂上生长体现3种菌落形状:(1)润滑型: 菌落边沿划一,外表有光芒、潮湿、润滑、呈灰色,在生理盐水中容易疏散。(2)粗糙型:菌落扁平、干涩、边沿不划一,易在生理盐水中自凝。(3)粘液型:常为含有荚膜的菌株。此菌兼性厌氧,在有氧条件下生长精良,最适生长pH为6.8-8.0,所用培育基pH为7.0-7.5,若pH值低于6.0或高于8.0则生长迟缓。

生化反响与血清学反响

  大肠杆菌属于卫生学意义的大肠菌群和粪大肠菌群的范围,因而,必需契合大肠菌群和粪大肠菌群的有关界说,在检测大肠菌群、粪大肠菌群的根底上,可以使用I(吲哚)、M(甲基红)、Vi(3羟基-2-丁酮)、C(柠檬酸)即IMViC生化实验对大肠杆菌作进一步判定,其IMViC后果为++--或-+--。生化反响是判定大肠杆菌的次要办法之一,但是,大肠杆菌之间生化反响的差别十分罕见,象:很多菌种非/迟发酵乳糖,但并不阐明它们遗传上有分明差别,生化反响非典范的大肠杆菌菌株与典范菌株的DNA相干性在85%-100%。附表1为大肠杆菌生化反响特性表。此中H2S、脲酶、阿糖酸、吲哚、ONPG实验常为首选生化反响,其他为进一步的生化实验。大肠杆菌在赖氨酸脱羧酶、粘质酸盐、醋酸盐生化实验中,有一项或多项实验阳性,且厌氧性生长弱,有动力和吲哚实验阳性可与志贺氏菌相辨别。

  大肠杆菌的血清学反响,每每是对经别离、判定、确证为大肠杆菌的进一步分型,常不作为惯例办法运用。附表2所列次要致泻性大肠杆菌的血清型。对大肠杆菌的分型判定任务,下层查验单元如有要求时,可与各地所属收支境查验检疫局实行室联络,委托停止血清学判定任务。

三、大肠杆菌的抵挡力:

  此菌对理化要素的抵挡力,在无芽胞菌中是最强的一种,在室温可存活数周,在泥土、水中存活数月,耐寒力强,但是在30分钟内疾速冷冻,将37℃降至4℃的进程,可杀去世此菌。加热60℃,30分钟,此菌可灭活。对漂白粉,酚、甲醛等较敏感,水中1ppb氯可杀去世此菌。此菌耐胆盐,在肯定水平上能抵挡煌绿等染料的抑菌作用,在选择性培育基配制上,常应用此菌这一性子。

四、卫生学意义与盛行学

  由于大肠杆菌是人及种种植物肠道中的正常旅居菌,常随粪便从人及植物体排挤,普遍散播于天然界,以是一旦检出大肠杆菌,即意味着间接或直接地被粪便净化,而在卫生学上被用于饮水,牛奶或食品等的粪源性净化卫生细菌学目标;而且由于大肠杆菌在外界存活工夫与一些次要肠道病原菌相近,它的呈现也能够预示着某些肠道病原菌(例:梵衲氏菌、志贺氏菌)的存在,因而该细菌是国际上公认的卫生监测指示菌。迩来,有些国度在实行HACCP办理中,将大肠杆菌检测作为微生物净化情况的监测目标和HACCP施行结果的评价目标。

  致泻性大肠杆菌是惹起人体以腹泻症状为主的环球性疾病,此中尤以EPEC、ETEC所占比例为大。附表3是我国局部省市次要腹泻病原体检出率状况,虽然现在报道各田主要腹泻病是由志贺氏菌或轮状病毒惹起的,但是,多年来,致泻性大肠杆菌惹起的腹泻病例一直位于第二位,可见大肠杆菌肠道感染的普遍性。另有,致泻性大肠杆菌亦可终年引发人体腹泻,以夏春季为顶峰,在患者熏染住院率中,婴幼儿占60%以上。迩来,EHEC O157:H7为世界卫生构造(WHO)定为新的食源性致病菌,其引发的出血性肠炎的爆发或分发病例,自1983年以来在北美州(美国、加拿大)地域逐年增多,英国、日本亦有迸发和分发病例报道,我国也发明分发病例,尚未有迸发EHEC的报道。附表4为近几年EHEC的净化情况。

五、大肠杆菌查验顺序图解:

LST肉汤

37℃,48h

LST肉汤管阳性 (疑似大肠菌群)37℃,48h      

EC肉汤  44℃,24h   EC肉汤产气管为阳性(粪大肠菌群)

阳性管再培育24h

EMB平板别离

 37℃,24h玄色菌落移种养分琼脂斜面

LST肉汤    IMViC生化实验    革兰氏染色

产酸产气   ++--/-+--      无芽胞G-杆菌

大肠杆菌

阐明:

1、由于大局部致泻性大肠杆菌在6℃条件中可得到生机,故大肠杆菌的定性检测比定量检测更适合。假如确有大肠杆菌定量检测要求的话,可用MPN法或起点浓缩法停止。

2、下层单元若有大肠杆菌生化判定要求或大肠杆菌血清学分型要求,可委托属地收支境查验检疫局停止查验。

3、检测大肠杆菌的MUG法和膜过滤法,可参阅有关规范阐明停止。

4、国标法与FDA办法,在所用培育基、查验顺序上略有差别,但不影响大肠杆菌查验后果的精确性。